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本研究主要是对半夏组织培养条件进行优化，为大规模进行工厂化生产提供技术支持，前人研究中培养基使用琼脂固化，本研究尝试使用卡拉胶代替琼脂固化，取得了良好的效果，卡拉胶较琼脂价格低很多，因此可以为大规模进行工厂化生产节约成本。
1、材料与方法
1.1 材料旱半夏小块茎， 购于安国市北方药材种子经销站。
1.2 消毒方法
取健康的旱半夏小块茎，用清水洗净，放于超净工作台中灭过菌的空三角瓶中，先用含有吐温的0.1%的升汞溶液消毒10～12 min，再用75%的酒精消毒30～60 s，最后再用无菌水冲洗5～6次，备用。
1.3 培养基及试验
设计设计以MS、1/2MS为基本培养基，基于我们的研究目的旨在指导并应用于大生产，所以为尽量节约成本和适应大规模生产所需，本试验选择了细胞分裂素中效果较好且最为廉价常用的6-BA、生长素选择了NAA，以期筛选出适合于半夏生产的最佳培养基。
发芽培养基：MS。
继代增殖培养基：在MS培养基中分别附加BA0.5，1.0，2.0，3.0 mg/L；NAA0.05，0.1，0.2，0.5 mg/L；采用二因素完全随机设计（见表1）进行最适激素配比的筛选，共计16个处理组合（见表2），每个处理接4株无菌苗，重复3次。表1 激素配比二因素完全随机设计因素水平（略）
生根培养基：在1/2MS培养基中分别附加0，0.01，0.05，0.10 mg/L NAA。
1.4 培养条件
所有培养基皆以浓度为0.7%的卡拉胶固化，含蔗糖均为3%，在高压灭菌前将pH值调至5.8，温度为（25±2）℃。光照1 500～2 000 lx，每日光照时数12～14 h。
结果
2.1 无菌苗的获得
将小块茎接种到MS培养基中进行发芽培养，培养4～7 d内进行观察统计发芽情况。观察统计发现，当培养7 d时，小块茎的发芽率达到了100%，继续培养无菌苗长势良好。
2.2 继代增殖培养
将小块茎发芽得到的无菌苗接种到表2处理组合的培养基中，培养1周左右无菌苗上端死亡，而在基部开始膨大，培养2周时形成愈伤组织（见图1），培养3周时愈伤组织分化成苗（见图2），培养4周时对其进行观察和相关数据统计。
从表2可见，1～6号培养基中组培苗没有增殖，而7～16号培养基均有一定程度的分化增殖，但是差别相对较大。从分化出的苗的高度以及增殖系数来看11号培养基最佳，增殖系数达到6.5，平均苗高达2.5 cm。其他培养基的增殖系数分布在1.2～4.0之间，平均芽苗高分布在1.2～2.0之间。从而筛选出最适继代增殖培养基为： MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L。继代分化增殖情况见图3。表2 植物激素配比对旱半夏继代增殖培养的影响（略）
2.3 生根培养
选择继代培养后生长健壮并且有一定高度的试管苗，将其分成单株，分别接种到生根培养基上培养，10 d后观察并统计结果。见表3。表3 不同生长素浓度对旱半夏生根的影响。
从表3可见，NAA的浓度以0.1 mg/L时为最佳浓度，可长出4～5条根，生根率达到100%，从而筛选出最适生根培养基为：1/2MS+NAA0.1 mg/L，并且在此培养基上生长的组培苗根部无愈伤组织形成，有利于下一步移栽的成活。
2.4 移栽
选择生根良好的试管苗进行移栽，移栽前，先将试管苗从培养室中移至气温较低的室内进行练苗2～3 d，而后再在室内开瓶练苗2～3 d，最后，在瓶内加少许自来水练苗1～2 d后将其移栽至经高压灭菌的栽培土中，栽苗后需浇透水，初期加盖覆盖物，保温保湿，管理期间，土壤切忌太湿和应注意保持空气湿度。当确定苗已经成活并且长势良好时，再将覆盖物去掉暴露在空气中生长。
3、讨论
旱半夏分化增殖最适培养基为：MS+6-BA2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L，增殖系数达到6.5，平均苗高达2.5 cm；生根最适培养基为：1/2MS+NAA0.1 mg/L，生根率达到100%。
在生根过程中选苗是很关键的，苗的高度不是主要因素，主要还是要看其健壮程度，细弱的苗生根移栽后是很难成活的。应选择健壮且有一定高度的组培苗来进行生根培养，生根后根部应没有愈伤组织形成，如果有愈伤组织即使根长的很好，移栽后也很难成活。移栽时最好在根长1～1.5 cm之间时，根长的太长后已老化，吸收养分的能力下降导致苗不易成活。