材料处理
外植体选择
在生长健壮、无病虫害的盆栽橡皮树植株上切取当年生嫩枝作为外植体。
材料的处理与灭菌
将外植体去掉叶片及叶柄,剪成带顶芽和腋芽的茎段,长约3一5cm左右。先用中性洗洁精溶液浸泡10一20min,自来水冲洗20一30min。在超净台上将预处理后的外植体用75%酒精表面消毒305,无菌水冲洗3遍。再用2%次氯酸钠浸泡振荡灭菌10一15min或用0.1%升汞溶液灭菌10一15min,无菌水冲洗3一5遍,滤去无菌水后滤纸吸干备用。
组培养殖
诱导培养
将灭过菌的顶芽和带腋芽茎段接种在MS+BA2mg/L+IAA0.2mg/L诱导培养基上。诱导培养30一45天后,诱导顶芽和腋芽萌芽,然后分化出丛生芽。增殖培养
将丛生芽切成单株接入MS+BA0.5mg/L+IAA0.05mg/L增殖培养基中进行增殖培养,增殖培养30一45天后,分化出丛生芽,增殖率可达3倍以上,且长势好,叶片特性能保持原性状。壮苗培养增殖丛生芽生长在细胞分裂素浓度较高的培养基中,芽生长较弱,且芽体内又积累了一定量的细胞分裂素,此时剪下作为生根苗质量差,不利于生根,所以增殖丛生芽用于生根时,需进行壮苗培养。壮苗培养基一般是在增殖激素的量上降低一半或更多。将增殖的丛生芽转入1/2MS+BA0.1mg/L+IAA0.0lmg/L壮苗培养基后,腋芽萌发减少,株高生长迅速,芽粗壮,节间距加长,叶片变大,20一30天后,幼苗茎高可达到3一5cm。
生根培养经壮苗培养的无根组培苗,当茎高为3一5cm时,从茎的基部切断,转到1/2MS+NAA0.2mg/L生根培养基进行生根培养。培养10一15天后陆续有根产生,根系粗壮、整齐,组培苗长势好,叶片浓绿有光泽。
基本培养基和培养条件
(1)基本培养基
所用的基本培养基为MS培养基或大量元素减半的1/2MS培养基,添加蔗糖或白糖30g/L,琼脂7g/L,pH值为5.8。
(2)培养条件
培养室温度25℃土2℃、光照10一12小时/天、光强2OO01x。
驯化与移栽
(1)移栽时间
橡皮树在有加温设备的温室内可一年四季进行组培苗移栽,但在没有加温条件时,一般可在3一11月进行移栽,最佳时间为4一6月和9一11月,气温在12℃一25℃之间,且空气相对湿度较大,移栽的植株成活率较高。
(2)驯化与移栽
生根培养20一30天后,组培苗长到4一5片叶、3一4条根且苗高为5一7cm,植株株体较健壮时,将培养瓶置于温室大棚的苗床上,利用自然光照进行过渡驯化,以增强幼苗对环境的适应能力。驯化5一7天后将幼苗取出,在清水中洗净附着在根上的培养基。移栽基质由泥炭:珍珠岩:蛙石按体积比2:1:l配制而成,移栽穴盘采用72孔或50孔,基质装满孔穴,用50%多菌灵500倍液浸湿消毒处理。每穴移栽1株组培苗后压实基质。移栽完毕后将穴盘放置苗床上,浇足定根水。
(3)移栽后管理
移栽后第1周要覆盖塑料薄膜,第2周逐渐增加通风,以便使组培苗尽快适应外部环境。第2周后每天叶面喷雾1一2次。棚内温度保持在20℃一25℃,相对湿度在90%以上,用遮阳网遮去强光,橡皮树生长很快,每周长出1片新叶。移栽第4一8周,逐渐增加光照,结合浇水,每10天可用0.3%尿素溶液和磷酸二氢钾溶液进行叶面喷施。移栽2个月后可定植,移栽成活率可达90%以上。